Reacción en cadea da polimerase, abreviado comoPCRen inglés, é unha técnica de bioloxía molecular utilizada para amplificar fragmentos específicos de ADN.Pódese considerar como unha replicación especial do ADN fóra do corpo, que pode aumentar moito unha cantidade moi pequena de ADN.Durante toda aPCRproceso de reacción, unha clase de substancias xoga un papel vital: as encimas.
1. ADN Taq
En experimentos nos primeiros tempos dePCR, os científicos utilizaron Escherichia coli ADN polimerase I, Pero hai un problema con esta encima: necesita repoñer unha nova encima cada vez que se realiza un ciclo, o que fai que os pasos da operación sexan lixeiramente complicados e sexa difícil amplificar completamente automaticamente.Este problema resolveuse despois de que os científicos illasen accidentalmente a ADN polimerase Taq de Thermus aquaticus en 1988. Desde entón, a amplificación automática do ADN converteuse nunha realidade.O descubrimento deste encima tamén faiPCRtecnoloxía unha tecnoloxía conveniente, práctica e universal.Actualmente, a ADN polimerase Taq é a polimerase máis común nos kits de ADN.
2. PfuDNA
Como se mencionou anteriormente, a Taq ADNase ten un gran erro, polo que os científicos modificaron a Taq ADN polimerase ata certo punto para evitar a amplificación inespecífica debido á falta de correspondencia, o que resulta en resultados de proba inexactos.Pero a modificación da ADN polimerase Taq pode inhibir a actividade da ADN polimerase a temperatura ambiente.A PfuDNA polimerase pode compensar as desvantaxes anteriores da ADN polimerase Taq, polo que a reacción de PCR pode levarse a cabo con normalidade e a taxa de éxito da amplificación do xene diana pode mellorarse de forma efectiva.
3. Transcriptase inversa
A transcriptase inversa foi descuberta en 1970. Este encima usa ARN como molde, dNTP como substrato, segue o principio de emparellamento de bases e sintetiza unha cadea única de ADN complementaria ao molde de ARN na dirección 5′-3′.A transcriptase inversa depende principalmente da actividade da ADN polimerase dos moldes de ADN ou ARN e, polo tanto, non ten actividade exonuclease 3′-5′.Non obstante, ten actividade RNase H, que limita a lonxitude de síntese da transcriptase inversa ata certo punto.Debido á baixa fidelidade e termoestabilidade da transcriptase inversa salvaxe, os científicos tamén a modificaron.
ParaPCRexperimentos, os principais consumibles son: tubo de PCR individual, tubo de PCR de 4/8 tiras, placas de PCR.
de LabioConsumibles de PCRten o seguintevantaxes:
Placas de PCR: Ampla compatibilidade do termociclador;Alto contraste, fácil identificación de pozos;ben reflexo de fluorescencia; botransferencia de calor;Inhibidores de DNase, RNase, ADN e PCR certificados e probados libres de piróxenos.
Tubos de PCR individuais: Resistente á evaporación; botransferencia de calor;excelente claridade óptica; DNase, RNase, ADN, inhibidores de PCR certificados e probados libres de piróxenos.
Tubos de PCR de 4/8 tiras: Paredes ultrafinas; alta claridade; boa reflexión de fluorescencia;pódese usar na industria farmacéutica, na industria alimentaria e na bioloxía molecular; material de PP virxe de alta calidade; DNase, RNase, ADN, inhibidores de PCR certificados e probados libres de piróxenos.
Hora de publicación: 09-06-2023