Introdución aos medios de cultivo microbianos comúns (I)

Introdución aos medios de cultivo microbianos comúns (I)

O medio de cultivo é unha especie de matriz nutritiva mixta preparada artificialmente a partir de varias substancias segundo as necesidades de varios crecementos microbianos, que se usa para cultivar ou separar varios microorganismos.Polo tanto, a matriz de nutrientes debe conter nutrientes (incluíndo fonte de carbono, fonte de nitróxeno, enerxía, sal inorgánica, factores de crecemento) e auga que poidan ser utilizadas por microorganismos.Dependendo do tipo de microorganismos e da finalidade do experimento, existen diferentes tipos e métodos de preparación de medios de cultivo.

Algúns medios de cultivo comúns no experimento introdúcense do seguinte xeito:

Medio de agar nutricional:

O medio de agar nutritivo utilízase para a propagación e cultivo de bacterias comúns, para a determinación do reconto total de bacterias, a conservación de especies bacterianas e o cultivo puro.Os principais ingredientes son: extracto de tenreira, extracto de levadura, peptona, cloruro de sodio, agar en po, auga destilada.A peptona e o po de carne proporcionan fontes de nitróxeno, vitaminas, aminoácidos e carbono, o cloruro de sodio pode manter a presión osmótica equilibrada e o agar é o coagulante do medio de cultivo.

O agar nutricional é o tipo máis básico de medio de cultivo, que contén a maioría dos nutrientes necesarios para o crecemento microbiano.O agar nutricional pódese usar para o cultivo bacteriano rutineiro.

Medio de agar sangue:

O medio de agar sangue é un tipo de medio de peptona de extracto de carne que contén sangue de animais desfibrinado (xeralmente sangue de coello ou sangue de ovella).Polo tanto, ademais de varios nutrientes necesarios para cultivar bacterias, tamén pode proporcionar coenzima (como o factor V), hemo (factor X) e outros factores especiais de crecemento.Polo tanto, o medio de hemocultivo utilízase a miúdo para cultivar, illar e preservar certos microorganismos patóxenos que son esixentes para a nutrición.

Ademais, o agar sangue adoita usarse para a proba de hemólise.Durante o proceso de crecemento, algunhas bacterias poden producir hemolisina para romper e disolver os glóbulos vermellos.Cando medran na placa sanguínea, pódense observar aneis hemolíticos transparentes ou translúcidos ao redor da colonia.A patoxenicidade de moitas bacterias está relacionada coas características hemolíticas.Debido a que a hemolisina producida por diferentes bacterias é diferente, a capacidade hemolítica tamén é diferente e o fenómeno de hemólise na placa sanguínea tamén é diferente.Polo tanto, a proba de hemólise úsase a miúdo para identificar bacterias.

Medio TCBS:

TCBS é un medio de agar-sacarosa de sal biliar de tiosulfato citrato.Para o illamento selectivo de vibrio patóxeno.A peptona e o extracto de levadura úsanse como nutrientes básicos no medio de cultivo para proporcionar fonte de nitróxeno, fonte de carbono, vitaminas e outros factores de crecemento necesarios para o crecemento das bacterias;A maior concentración de cloruro de sodio pode satisfacer as necesidades de crecemento halófilo do vibrio;sacarosa como fonte de carbono fermentable;O citrato de sodio, o ambiente alcalino de pH alto e o tiosulfato de sodio inhiben o crecemento das bacterias intestinais.O po de bilis de vaca e o tiosulfato de sodio inhiben principalmente o crecemento de bacterias grampositivas.Ademais, o tiosulfato de sodio tamén proporciona unha fonte de xofre.En presenza de citrato férrico, o sulfuro de hidróxeno pode ser detectado polas bacterias.Se hai bacterias produtoras de sulfuro de hidróxeno, xerarase sedimento negro na placa;Os indicadores do medio TCBS son o azul de bromocresol e o azul de timol, que son indicadores ácido-base.O azul de bromocresol é un indicador ácido-base cun rango de cambio de pH de 3,8 (amarelo) a 5,4 (azul-verde).Hai dous intervalos de decoloración: (1) o intervalo de ácido é de pH 1,2~2,8, cambiando de amarelo a vermello;(2) O rango de álcali é de pH 8,0 ~ 9,6, cambiando de amarelo a azul.

Medio de agar peptona de soia de queixo TSA:

A composición do TSA é semellante á do agar nutriente.Na norma nacional, adoita usarse para probar bacterias de sedimentación en salas limpas (áreas) da industria farmacéutica.Seleccione o punto de proba na zona a probar, abra a placa TSA e colócaa no punto de proba.As mostras tomaranse cando se expoñan ao aire durante máis de 30 minutos durante diferentes tempos, e despois cultivaranse para o reconto de colonias.Os diferentes niveis de limpeza requiren un reconto de colonias diferente.

Ágar Mueller Hinton:

O medio MH é un medio microbiano usado para detectar a resistencia dos microorganismos aos antibióticos.É un medio non selectivo no que poden crecer a maioría dos microorganismos.Ademais, o amidón dos ingredientes pode absorber as toxinas liberadas polas bacterias, polo que non afectará os resultados da operación con antibióticos.A composición do medio MH é relativamente solta, o que favorece a difusión de antibióticos, polo que pode mostrar unha zona de inhibición do crecemento evidente.Na industria sanitaria de China, o medio MH tamén se usa para a proba de sensibilidade ás drogas.Ao realizar unha proba de sensibilidade ao fármaco para algunhas bacterias especiais, como Streptococcus pneumoniae, pódese engadir ao medio un 5% de sangue de ovella e NAD para satisfacer diferentes necesidades nutricionais.

Ágar SS:

O agar SS adoita usarse para o illamento selectivo e o cultivo de Salmonella e Shigella.Inhibe bacterias grampositivas, a maioría dos coliformes e proteus, pero non afecta o crecemento da salmonela;O tiosulfato de sodio e o citrato férrico úsanse para detectar a xeración de sulfuro de hidróxeno, facendo negro o centro da colonia;O vermello neutro é o indicador de pH.A colonia de azucre en fermentación produtora de ácido é vermella, e a colonia de azucre que non fermenta é incolora.Salmonella é unha colonia incolora e transparente con ou sen centro negro, e Shigella é unha colonia incolora e transparente.