Un tubo de centrífuga é un tubo sinxelo que pode soportar altas velocidades de rotación e presión, como separar algunhas mostras e separar sedimentos sobrenadantes.O tubo de centrífuga de ultrafiltración ten dúas partes semellantes ao tubo interior e ao tubo exterior.O tubo interior é unha membrana cun certo peso molecular.Durante a centrifugación a alta velocidade, os que teñan un peso molecular máis pequeno filtraranse no tubo inferior (é dicir, o tubo exterior), e os que teñan un peso molecular maior quedarán atrapados no tubo superior (ou sexa, o tubo interior).Este é o principio da ultrafiltración e adoita utilizarse para concentrar mostras.
Os tubos de centrífuga de ultrafiltración adoitan usarse sen tratamento previo, pero para o procesamento de mostras de proteínas, especialmente para solucións de proteínas diluídas (< 10ug/ml), a taxa de recuperación da concentración con membranas de ultrafiltración adoita non ser cuantitativa.Aínda que os materiais PES minimizan a adsorción inespecífica, algunhas proteínas, especialmente cando están diluídas, poden ter problemas.O grao de unión inespecífica varía coa estrutura das proteínas individuais.As proteínas que conteñen dominios cargados ou hidrófobos teñen máis probabilidades de unirse de forma irreversible a diferentes superficies.O pretratamento de pasivación na superficie do tubo de centrífuga de ultrafiltración pode reducir a perda de adsorción de proteínas na superficie da membrana.Na maioría dos casos, o pretratamento da columna antes de concentrar a solución de proteína diluída pode mellorar a taxa de recuperación, porque a solución pode encher os sitios de adsorción de proteínas en branco expostos na membrana e na superficie.O método de pasivación consiste en remoxar previamente a columna cun maior volume de solución de pasivación durante máis de 1 hora, lavar a columna ben con auga destilada e, a continuación, centrifugala unha vez con auga destilada para eliminar completamente a solución de pasivación que pode quedar na película. .Teña coidado de non deixar secar a película despois da pasivación.Se queres usalo máis tarde, cómpre engadir auga destilada estéril para manter a película húmida.
Os tubos de centrífuga de ultrafiltración normalmente non se poden esterilizar e reutilizar.Dado que o prezo dun só tubo non é barato, moitas persoas intentan reutilizalo: a experiencia é limpar a superficie da membrana con auga destilada moitas veces e centrifugala unha ou dúas veces.O tubo pequeno que se pode centrifugar ao revés pódese mergullar en auga destilada e despois centrifugar ao revés durante máis veces, o que será mellor.Pódese empregar para a mesma mostra repetidamente e pode remollarse en auga destilada cando non estea en uso, pero deberase evitar a contaminación bacteriana.Non mesturar mostras diferentes.Algunhas persoas din que a remollo en 20% de alcohol e 1n NaOH (hidróxido de sodio) pode evitar o crecemento de bacterias e evitar o secado.Mentres a membrana de ultrafiltración invada a auga, non se pode deixar secar.Non obstante, outros din que destruirá a estrutura da membrana.En calquera caso, os fabricantes xeralmente non admiten a reutilización.O uso repetido bloqueará o tamaño dos poros da membrana do filtro e mesmo provocará fugas de líquido, o que afectará os resultados experimentais.
Hora de publicación: 05-09-2022